Khuếch đại đoạn đích để phát hiện
PCR tạo nhiều bản sao của đoạn DNA đích theo thiết kế xét nghiệm, nhờ đó hỗ trợ phát hiện tác nhân trong mẫu. Trong chuỗi minh họa SGK cho virus DNA: thu mẫu → tách chiết DNA tổng số → khuếch đại đoạn gene đích → kiểm tra sản phẩm khuếch đại, chẳng hạn bằng điện di.
Thu được DNA tổng số chưa đồng nghĩa đã chứng minh có virus đích. Tính phù hợp của đoạn đích, chất lượng mẫu, đối chứng và kiểm soát nhiễm đều quan trọng. Với tác nhân có RNA, cần bước chuyển RNA thành DNA bổ sung trong xét nghiệm phù hợp; không đem chuỗi PCR DNA áp nguyên xi cho mọi virus.
Đọc kết quả trong phạm vi xét nghiệm
Dương tính nghĩa là phát hiện đích xét nghiệm theo tiêu chí quy trình, không tự nói toàn bộ mức độ bệnh của đàn. Âm tính ở mẫu, thời điểm đã xét không chứng minh sạch mọi tác nhân: mẫu không đại diện, lượng đích thấp hoặc chất ức chế có thể ảnh hưởng.
Real-time PCR theo dõi khuếch đại bằng tín hiệu; định lượng cần quy trình, chuẩn và cách diễn giải phù hợp. Lượng DNA đích không tự đồng nghĩa mức độ biểu hiện bệnh hay số virus còn khả năng gây nhiễm. Đây là kiến thức nguyên lí; lấy mẫu bệnh và thực hiện xét nghiệm thuộc cơ sở, người có chuyên môn.
Âm tính cần kèm phạm vi
Báo cáo “không phát hiện đích WSSV trong mẫu theo phép thử đã dùng” chính xác hơn “cả ao không có bất kì mầm bệnh nào”. Câu sau mở rộng vượt đối tượng, mẫu và khả năng của xét nghiệm.
Bài luyện
Thứ tự phù hợp cho chuỗi PCR DNA minh họa là gì?
Chuỗi nêu đã bỏ nền vật chất và khuếch đại.
Màu ao không xác định đoạn gene.
Đúng: mỗi khâu tạo điều kiện cho khâu sau.
Không thể có kết luận có căn cứ bằng cách bỏ mẫu.
Lời giải
Đúng: mỗi khâu tạo điều kiện cho khâu sau.
Bài luyện
Tác nhân RNA cần lưu ý gì khi dùng phương pháp khuếch đại phù hợp?
Tên mẫu không thay bước kỹ thuật.
Đúng: phân biệt vật chất đầu vào và phản ứng.
RNA là acid nucleic.
Không được áp nguyên xi chuỗi DNA.
Lời giải
Đúng: phân biệt vật chất đầu vào và phản ứng.
Bài luyện
Kết quả âm với đích A trong một mẫu chứng minh điều gì?
Đúng: không mở rộng vượt bằng chứng.
Phép thử có đích và phạm vi cụ thể.
Nguy cơ có thể thay đổi sau xét nghiệm.
Mẫu và tác nhân khác còn có giới hạn chưa kiểm.
Lời giải
Đúng: không mở rộng vượt bằng chứng.
Đang học